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      產品中心

      當前位置:首頁產品中心DiacloneELISA Kit人白介素27 ELISA 試劑盒

      人白介素27 ELISA 試劑盒
      產品簡介:

      人白介素27 ELISA 試劑盒用于體外定量檢測人血清,血漿,緩沖液或細胞培養液中的白介素27。

      產品型號:

      更新時間:2025-06-30

      廠商性質:代理商

      訪問量:1062

      服務熱線

      01084640949

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      產品介紹

      Human IL-27 ELISA Kit

       用途:人IL-27 ELISA試劑盒用于體外定量檢測人血清,血漿,緩沖液或細胞培養液中的白介素27。此試劑盒只用于科研,不能用于診斷。

      檢測原理:

      IL-27試劑盒應用的是夾心法固相酶聯免疫吸附分析法(ELISA)。IL-27特異單克隆抗體被包被于微孔板上,已知IL-27濃度的標準品和未知濃度的樣品可在此反應孔中進行檢測。先將IL-27抗原和生物素標記IL-27特異單克隆抗體同時孵育。洗滌后加入親和素過氧化物酶,孵育后洗去未結合的酶。其后加入底物,產生顏色反應,顏色的深淺與樣品中IL-27的濃度成一定的比例關系。

      試劑盒組成及配制:

       

      試劑(2-8保存)

      1x96孔的配置

      產品編號:#850.960.048

       

      配制

      96T微孔板

      1

      即用型(已包被)

      塑料板蓋

      2


      標準品:1000pg/ml

      2瓶

      按瓶上的說明稀釋(見試劑制備,)

      標準品稀釋緩沖液

      1瓶(25ml

      即用型

      生物素標記IL-27抗體

      1瓶(0.4ml)

      用生物素標記抗體稀釋液稀釋(見試劑制備)

      生物素標記抗體稀釋液

      1瓶(7.5ml)

      即用型

      親和素-HRP

      2瓶(5ul)

      0.5ml HRP稀釋液預稀釋(見試劑制備,)

      HRP稀釋液

      1瓶(23ml)

      即用型

      洗滌緩沖液

      1瓶(10ml)

      200x,蒸餾水稀釋(見試劑制備)

      TMB

      1瓶(11ml)

      即用型

      H2SO4終止液

      1瓶(11ml)

      即用型

       

      自備材料:

      蒸餾水;加樣器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩渦振蕩器和磁力攪拌器

      保存條件:

      試劑盒保存于2-8度,

      洗滌緩沖液:制備好后,2-8度可保存1周以上

      標準品:制備好后即用,不要保存。

      生物素標記二抗:制備好后即用,不要保存。

      親和素-HRP: 制備好后即用,不要保存。

      樣品收集,處理和保存:

      1.       細胞培養上清:1000xg離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

      2.       血清——操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000xg離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

      3.       EDTA,檸檬酸鹽和肝素血漿可用于檢測。1000Xg離心30分鐘去除顆粒。

      4.       如果樣品不直接使用,將其分為小部分(250-500ul-70℃下保存,避免反復凍融。

      如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的顆粒,檢測前先離心或過濾。

      注意:不要在37℃或56℃加熱解凍。在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

      檢測程序

      使用前,將所有試劑充分混合,不要使液體產生泡沫。根據樣品數量加上空白,標準品決定所需的板條,每個樣品,標準品,空白和質控都應做雙份。

      詳細步驟

      1

      制備標準曲線

      2

      按實驗方案在對應孔加入100ul標準品和樣本,標準品,樣本及空白孔均做復孔。

      3

      用塑料膜封板,室溫(18-25.℃)孵育2小時

      4

      去掉封板膜,按以下程序洗板:

      a.  吸出孔內液體。

      b.  每孔加入300ul1X的洗滌緩沖液

      c.  吸出孔內液體

      d.  重復步驟bc兩次

      5

      加入50ul生物標記的IL-27抗體到各孔

      6

      用封板膜,封板,室溫(18-25.℃)孵育1小時

      7

      重復步驟4

      8

      加入100ul親和素-HRP溶液到各孔

      9

      用塑料膜封板,室溫(18-25.℃)孵育30min

      10

      重復步驟4

      11

      加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

      12

      室溫避光孵育10-20min,用鋁箔包住反應板,   避免光照。

       

      13

      加入100ul   H2SO4到各孔,終止反應。

      在分光光度計中讀取結果。450nm作為初始波長,630nm作為參考波長。

      更多產品訂購,請聯系Diaclone 中國區總代理北京博蕾德生物科技有限公司。


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